Quando la visualizzazione della capsula anteriore è compromessa a causa di un riflesso rosso assente o insufficiente, come in caso di cataratta matura, cataratta corticale densa, cataratta subcapsulare posteriore densa o occhi con vitreopatia asteroide densa, esiste un certo rischio di lacerazione della capsula anteriore che si estende alla periferia, con successiva predisposizione alla rottura della capsula posteriore, alla perdita del vitreo e alla dislocazione posteriore del nucleo.

La colorazione della capsula anteriore con coloranti contenenti trypan blue (TB), eseguita per la prima volta da Melles et al. nel 1999, aiuta i chirurghi a completare la capsuloressi in queste situazioni difficili.

Una bassa concentrazione di colorante a base di trypan blue, come ad esempio 0.05%, può fornire una buona colorazione della capsula anteriore e la tossicità endoteliale è comunemente considerata trascurabile quando il colorante contenente trypan blue viene usato a bassa concentrazione.

Tuttavia, per garantire la massima sicurezza del paziente, la biocompatibilità deve essere sempre verificata e la determinazione della citotossicità è parte del processo di valutazione iniziale previsto dalla norma ISO.

La ricerca di metodi veramente affidabili per testare la biocompatibilità e la citotossicità è sempre stata una delle missioni principali di Alchilife. Questo è il motivo per cui il test di citotossicità in vitro con metodo per contatto diretto secondo ISO 10993-5, che è altamente sensibile e in grado di rilevare anche una debole citotossicità, è sempre stato il metodo di elezione utilizzato nei nostri laboratori di ricerca.

Utilizzando questo approccio, il dipartimento R&D di Alchimia ha convalidato quantitativamente e qualitativamente il test di citotossicità dei coloranti vitali del segmento anteriore secondo la norma ISO 10993-5. Utilizzando solo 30 µl di colorante applicato sulle linee cellulari ARPE19 e BALB 3T3 per 24 ore, l’assenza o la presenza di una qualche citotossicità in tutti i tipi di coloranti a base di trypan blue può essere facilmente e attendibilmente accertata.

Un aspetto dei metodi per testare la citotossicità adottati dalla nostra Ricerca e Sviluppo che merita particolare attenzione è quello di fornire “un’ulteriore garanzia” sulla sicurezza dei coloranti a base di trypan blue da utilizzare durante la chirurgia del segmento anteriore: è stato scelto di eseguire il test di citotossicità non solo sulla linea di fibroblasti murini BALB 3T3, ma anche sulla linea cellulare epiteliale del pigmento retinico umano ARPE19.

Questo è il nostro metodo per garantire che i coloranti a base di trypan blue siano sicuri anche in caso di colorazione involontaria del vitreo durante l’intervento chirurgico di cataratta – un evento che può verificarsi, sebbene non frequentemente, durante l’intervento chirurgico del segmento anteriore.

Riferimenti:

  • Parkash et al. Modified 30 G needle trypan blue staining technique under air for a uniform and consistent anterior capsule staining. Clin Ophthalmol 2017; 11:1651-1659
  • Melles GRI et al. Trypan blue capsule staining of visualize the capsulorhexis in cataract surgery. J Cataract Refract Surg 1999; 25:7-9
  • ISO 10993-5, 2009. Biological evaluation of medical devices – Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity. https://www.iso.org/obp/ui/#iso:std:iso:10993:-5:en
  • Coelho RP. Inadvertent vitreous staining by trypan blue during phacoemulsification. Vis Pan-Am 2016; 15:26-27.
  • Gaur A. Inadvertent vitreous staining. J Cataract Refract Surg 2005; 31:649.